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PAGE预制胶12%
货号:5212
产品规格:
产品价格:¥300.00

产品简介:  PAGE预制胶 是一款安全、快捷、高性能的预制凝胶,常用于 PAGE 和 Western Blot 检测。

  1. 预制胶中不含 SDS,可用于变性和非变性电泳
  2. 低吸附性: 采用镀膜塑料胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为敏锐,清晰。
  3. 稳定高效: 采用自动化的灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性。
  4. 兼容性高: 兼容市场上主流的 mini 电泳槽,如 Bio-Rad, 天能和君意东方等。
  5. 全新配方: 适配市面上常用的电泳缓冲液 。
  6. 浓度 孔数 最大上样量 建议电压 缓冲液
    12% 10 50ul 180 Tris-Gly/Hepes/MOPS/MES

胶板尺寸:宽×高×厚度为100*89*4.8mm;

凝胶尺寸:宽×高×厚度为84*74*1mm;

凝胶厚度:1.0mm;

产品包装:20片/盒。

使用说明:

预制胶本身都不含 SDS,可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳

非变性电泳(Native-PAGE)

1. 将 Plastic gel 预制胶 Uni PAGE 从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带;

2. 将预制胶固定在电泳槽中;

3. 向电泳槽中加入 1 × 非变性电泳缓冲液。内槽加满电泳缓冲液,外槽电泳缓冲液需至少加至 1/3 液面,最 高不可漫过胶板,然后缓慢拔出梳子;

4. 用移液器轻轻吹打加样孔,清除残余胶液;

5. 上样:将非变性蛋白样品与如 5 × 非变性 Loading buffer进行 4:1 混合均匀。上样时注意枪头勿刺 破凝胶或插入过深使胶板变形造成后续电泳时漏液;

(酸性蛋白(等电点 pI)正常上样电泳即可。反之,碱性蛋白(等电点 pI>7)带正电荷,需将电极插反(红插黑,黑 插红),这时上样孔成为正极,样品向下电泳)

6. 接通电源,恒压条件下(180 V)跑胶。当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束 电泳。

7. 电泳结束,取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘顶部慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。(请务必从侧边顶部开始起翘)。

注:非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

变性电泳(SDS-PAGE)

1. 将 Plastic gel 预制胶 Uni PAGE 从包装袋中取出,撕掉底部密封胶带。固定在电泳槽中,安装好电泳装置;

2. 向电泳槽中加入 1 × 变性电泳缓冲液。内槽加满电泳缓冲液,外槽电泳缓冲液需至少加至 1/3 液面,最高 不可漫过胶板,然后缓慢拔出梳子;

3. 用移液器轻轻吹打加样孔,清除残余胶液;

4. 上样:将蛋白样品与如 5 × 变性 Loading buffer进行 4:1 混合均匀,加热处理。上样时注意枪头勿 刺破凝胶或插入过深使胶板变形造成后续电泳时漏液;

5. 接通电源,恒压条件下跑胶(180 V),当溴酚蓝指示带至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳;

6. 电泳结束,取出凝胶。用螺丝刀在板子侧边缘顶部慢慢撬开板子,打开胶盒,轻轻取出凝胶。(请务必从侧边顶部开始起翘)。

产品运输和保存:

1. 常温运输。常温保存时应放置于阴凉处,避免温度剧烈变化和阳光直射;

2. 常温保存1个月,2-8℃保存12个月,常温运输,夏季无需放置冰袋。

3. 请勿置于 0℃以下,凝胶在 0℃以下会冻凝,产生气泡和裂纹,导致凝胶报废

 

注意事项:

1. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至 150 V,并适当延长电泳时间;

2. 电压为 180 V 电泳时,1 块胶的初始电流在 75 mA 左右,2 块胶的初始电流在 150 mA 左右,且随时间增 加电流逐步降低;

3. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能 确保电泳效果;

4.本品适用于11-300kDa

5. 拆胶:请务必从侧边顶部开始起翘

6. 湿转时 120 V 恒压转膜 60 - 90 min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染 marker 及膜 上的预染 marker 确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇 浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶; 蛋白分子量 100 kDa 以上建议甲醇浓度 5%  ,10-100 kDa  建议甲醇浓度  10% 。

7.若使用Bio-Rad 电泳槽 请将U型密封条翻转