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CCK8细胞增殖及毒性检测试剂盒（增强型）
产品简介：
Cell Counting Kit-8（简称CCK-8） 试剂中含有 WST-8（水溶性四唑盐）在电子介体的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙色甲臜产物，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析，细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。使用酶标仪在450 nm 波长处测得的吸光值即可间接反映活细胞的数量。本产品可广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验，是一款快速、高灵敏度、无放射性的检测试剂。
产品特点：
· 操作简便：即开即用，无需配制其他试剂
· 灵敏度高：灵敏度高、反应时间短、线性范围宽、数据可靠、重现性好
· 细胞毒性低: 对细胞毒性低，不影响后续实验
注意事项
1. 建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。
2. CCK-8 反应时间的确定：一般情况下，白细胞显色比较困难，因此需要增加细胞数量和延长 CCK-8 反应时间。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色，因此悬浮细胞在加入 CCK-8培养 0.5-4 小时后，可先从培养箱取出，目测或用酶标仪测定显色程度，若显色困难可以 继续培养数小时后再确定。对于贴壁细胞，CCK-8 的培养时间一般为 0.5-4 小时，在培养20 分钟左右即可取出肉眼观察显色程度。
3. 每孔接种细胞数：当使用标准 96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为 1000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于 2500 个/孔 (100 μl 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10%加入 CCK-8 溶液。
4. 设定空白对照：在不含细胞的培养基中加入 CCK-8，培养一定的时间，测定 450 nm 的吸光度即为空白对照。在做加药实验（细胞毒性实验）时，还应考虑药物的吸收，可在加入药物的培养基中加入 CCK-8，培养一定的时间，测定 450 nm 的吸光度作为空白对照。
5. 影响 CCK-8 测定的物质： 由于 CCK-8 检测细胞活性的原理是通过检测活细胞脱氢酶催化的反应，所以如果待测体系中存在氧化还原物质则可能会干扰检测结果，还原性物质会使吸光度增加，氧化性物质会使吸光度减小，因此应需设法去除这些物质的影响。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响，培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除只含有培养基的对照孔中本底吸光度而消除，因此不会对检测结果造成影响。
6. 测定波长：如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议采用双波长进行测定，检测波长450nm，参比波长 600-650nm。如果没有 450nm 的滤光片，可以使用吸光度在 430-490nm 之间的滤光片，但是 450nm 检测灵敏度最高。
7. 当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误差。一般情况下，最外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。
8. 如果细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化，应洗涤细胞更换培养基后再加 CCK-8 检测。
9. 为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
